进行肛门检查，首先应当选择合适的体位，可选择膝胸位、截石位、弯腰俯卧位，有时也可以采取左侧卧位，选择合适的体位，对检查疾病有很大的帮助。首先应当进行肛门视诊，观察肛门的位置是否有异位变形等。然后观察肛门周围的皮肤及颜色，是否存在着红斑、糜烂、渗出，是否有肿物。
早期肛瘘通过直肠肛门指检，可以摸到条索状的一个管道、大部分通过目测和直肠肛门指诊即可检查出来，少部分复杂或难以确诊的，做腔内超声或者是肛周超声或核磁共振进行确诊，通过直肠腔内超声，能够发现直肠肛围的脓肿、管道等。
早期脱肛与痔疮、肛乳头肥大症状相似，都是无痛性肿物脱出，极易造成不规范的小诊所及经验欠缺的医师误诊，因此，检查脱肛，先进的检查仪器必不可少。对于脱肛、痔疮等肛肠疾病的检查，还通过科学的专业仪器——德国GU-C四维超导造影检查系统。
胃镜检查时，医生右手持镜前段将胃镜放入舌根部，此时病人进行吞咽动作，将胃镜送入食道，而后继续向下送镜子观察胃及十二指肠情况。肠镜是利用一条装有微型摄影机的纤维软管进行检查，其由肛门进入肠道，顺势观察肠腔情况。
肛瘘的检查方法可以做肛门指检，肛门指检为最常见、最直接的检查方法，可触及条索状物及硬结。还有就是美兰造影，将美兰从外口打进，如果美兰由肛门流出，可诊断肛瘘。影像学检查包括B超、磁共振、肛瘘造影。手术探查需在麻醉状态下进行。
血清免疫学标记：常用酶联免疫试验（ELISA)或放射免疫测定(RIA)法检测血清HDAg和抗-HD。急性HDV感染时HDAg仅在血中出现数日，随之出现抗-HDlgM，持续不间断时间也较短。协同感染HBV和HDVB寸，抗-HBr。IgM同时阳性，重叠感染HBV+HDV时，常表现为抗-HBcIgM阴性，抗-HDIgM和抗-HBcIgG阳性。慢性HDV感染时抗-HBclgM持续不间断升高。
