甲氨蝶呤和叶酸片一般都是分开服用的，常用的服用方法就是服用甲氨蝶呤的第二天服用叶酸，如需同时服用，至少要间隔两个小时，而且尽量不要同时服用，以免影响甲氨蝶呤的药效。要单独服用才好。
甲氨蝶呤片主要治疗各种急性白血病，特别是急性淋巴细胞白血病、恶性淋巴瘤，非何杰金氏淋巴瘤和蕈样肉芽肿，多发性骨髓病，头颈部癌，肺癌、各种软组织肉瘤、银屑病，乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、恶性葡萄胎，绒毛膜上皮癌，睾丸癌。
甲氨蝶呤片不是激素药。甲氨蝶呤是一种抗叶酸抗肿瘤药物，但同时它也是一种免疫抑制药物。临床上它可以用于急性淋巴细胞白血病、恶性淋巴瘤、乳腺癌等肿瘤性等疾病的治疗，或者是应用于宫外孕保守治疗。
甲氨蝶呤可以用来治疗宫外孕，因为该药适用于早期的输卵管妊娠，要求是没有药物治疗禁忌症，输卵管妊娠未破裂或流产，输卵管妊娠包块直径不超过四厘米，无明显内出血。
甲氨蝶玲治疗银屑病的效果是比较显著的，可以用于治疗顽固的寻常型银屑病，既可以作为短期内应用控制脓疱型，红皮病型和关节型银屑病，又可作为长期维持治疗，口服、肌肉注射、静滴均可。
甲氨蝶呤片主要是治疗各型急性白血病，特别是急性淋巴细胞白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓病；头颈部癌、肺癌、各种软组织肉瘤。除了服用期间控制自己的饮食以外，不能吃辛辣、油腻等食物，还应该注意甲氨蝶呤片有致突变性，致畸性和致癌性较烷化剂为轻，但长期服用后，有潜在的导致继发性肿瘤的危险，不要长时间的服用该药物。