不稳定血红蛋白是血红蛋白病的一种类型。国内已发现的不稳定血红蛋白有十余种。目前常用于鉴别不稳定血红蛋白的方法有三种。
加热法:<5%。
异丙醇法:阴性。
红细胞变性球蛋白小体法:<1%。
升高(或阳性):不稳定血红蛋白病。
(1) 热不稳定试验:
① 被检Hb要新鲜制备。陈旧Hb可转变为高铁Hb。会出现假阳性。
② 保温时间要准确,温度要恒定以免出现假阳性。
(2) 异丙醇试验:
① 17%异丙醇溶液配制后放置不宜过久,否则易出现假阴性。
② 血红蛋白液须新鲜。如保存较久,出现高铁血红蛋白,可形成假阳性。
③ 试剂要预热,严格控制温度以防假阳性。
④ 高HbF及G-6-PD缺乏的标本亦可出现阳性。
(3) 红细胞变性珠蛋白小体检查:
① 本试验亦可用静脉抗凝血做。
② 孵育时间与不稳定血红蛋白性质有关。一般1-2h即可出现明显的蓝色球形折光小体,但也有的不稳定血红蛋白需更长时间的孵育。才出现典型的变性珠蛋白小体。
③ 制片后应及时计数,存放过久,则红细胞内变性珠蛋白小体消失。如不能及时计数,可存放于干燥器或37℃温箱。
④ 煌焦油蓝染色后不能用伊红-美蓝染色液复染,复染后可减少计数结果。
⑤ 变性珠蛋白小体需与网织红细胞鉴别。前者包涵体呈较大圆形,均匀,弥散沉淀,整个红细胞基质消失,而且需培育10min以上才逐渐清晰。而网织红细胞在血液与煌焦油蓝混合后数分钟内显示出网状沉淀,红细胞基质完整。
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