脯氨酸肽酶(PLD)或脯肽酶,是一种广泛存在于人体各组织和细胞的亚氨基肽酶,它催化含有C-末端脯氨酸或羟脯氨酸2肽的水解,对胶原合成和细胞生长过程中脯氨酸的再循环起重要作用。其血中水平变化与肝损害程度及肝病慢性化密切相关。
改良比色法:100例健康人血浆PLD活性为1107.4±194.5U/L。男性(1115.3±208.1U/L)略高于女性(1089.9±182.4U/L),但无显著性差异(P>0.05)。
异常结果:(1) 急性肝炎:急性肝炎患者血清PLD活性显著升高,与PLD呈正相关。单剂量注射CCL4致大鼠急性肝损伤实验表明,PLD在注射后3h血清值(3000±190U/L)明显高于正常对照组(2450±40U/L),24h达峰值(3780±230U/L)72h恢复止常,此时ALT、AST仍高于正常。胡大荣等报道急性病毒性肝炎患者血浆PLD活性(2746.1±985.1U/L)显著高于正常对照组(1107.4±194.5U/L),与同组患者ALT异常率相同,均为93.8%。表明PLD是反映急性肝损伤及恢复的敏感性指标。急性肝炎时血清PLD升高可能与肝细胞坏死溶解,PLD释放入血有关。(2) 慢性肝病:国外资料显示,慢性肝炎、肝硬化患者血清PLD增高,而同组患者ALT多正常。给大鼠注射CCL4致慢性中毒性肝损伤的实验研究发现,第3周PLD在正常范围内波动,但有上升趋势,而组织学已能见到鼠肝纤维化发展;6周时,PLD达峰值,肝组织可见广泛性可复发性纤维化;12周时,PLD下降并接近正常,而组织学可见肝硬化形成。胡大荣等报道,慢活肝患者血浆PLD(1944.4±213.0U/L)显著高于正常对照组,其变化与ALT无明显相关(r=0.1630,P>0.05),阳性率(90.1%)明显高于ALT(P>0.05);肝硬化患者PLD升高最显著(2497.4±259.4U/L),阳性率为90.5%,而ALT仅为4.8%(P>0.01)。研究结果表明,PLD在反映慢性肝病、进展性肝纤维化,尤其是ALT、正常时更具有实用价值。慢性肝病如ALT正常,而PLD明显增加,则应考虑肝硬化之可能。故PLD检测可作为诊断或预防肝硬化的指标。慢性肝病患者PLD升高,可能与肝细胞内PLD活性增强、细胞内胶原降解加速、脯氨酸含量升高,使细胞间胶原合成增加有关。(3) 乙醇性肝病:Brosset等对53例乙醇性肝病患者血浆PLD水平与肝活检的相关性研究发现,乙醇性肝病患者血PLD均升高,病理显示为可复性肝纤维化和不可复性肝纤维化,而无急性乙醇性肝损伤表现;肝硬化伴急性乙醇性肝损伤者,PLD水平则高于可复性和不可复性肝纤维化者。乙醇性肝病患者血PLD水平与ALT无关,但与AST相关(r=0.505,P>0.001)。这与乙醇性肝病患者肝细胞病理损害主要在线粒体,而肝细胞中80% AST。分布在线粒体的结论是一致的。(4) 重症肝炎:Myara等报道20例重症肝炎患者血PLD轻度升高,显著升高者较少。胡大荣等认为重症肝炎患者,就平均值而言,PLD和ALT水平高于健康人,二者变化呈正相关(r=0.965,P>0.01),但显著升高者仅见于少数患者,异常率也无明显差异。与ALT在重型肝炎患者血中变化一样,PLD也存在“酶胆分离”现象。需要检查人群: 肝脏疾病的诊断标准之一。
检查前注意:(1) 抽血检查的早上不能吃早餐。(2) 抽血前最好不要抽烟,喝酒,熬夜。注意休息。检查时要求:(1) 检查时应当告知医生药物史。(2) 检查时如有不适(如头晕等),应当告知医生。不适宜人群:无不适宜人群。
使用改良比色法检查。(1) 抽取3毫升血液,置于抗凝管里,放进4℃微型台式离心机离心,小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管,移取适量微升进行蛋白定量检测,即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存;抽取3毫升血液,置于储存管里,室温下静置,放进4℃微型台式离心机离心,移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管,进行蛋白定量检测;抽取1毫升血液,置于抗凝管里,放进4℃微型台式离心机离心,小心抽去上层黄色液体,加入预冷的无离子水,涡旋震荡,即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存。(2) 准备好上述待测样品,置于冰槽里。设定好分光光度仪,波长515nm,并置零。放进分光光度仪检测,此为背景空对照。
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