β-内酰胺酶是指能催化水解生物分子中β -内酰胺环中的的酰胺键的灭活酶。细菌产生β- 内酰胺酶是细菌对β -内酰胺类抗生素耐药的主要机制。β- 内酰胺酶类抗生素包括青霉素类 ,头孢菌素类 ,非典型 β- 内酰胺类等 ,是品种最多 ,研究进展最快 ,临床应用最广泛的一大类药物。
体内菌群的种类和比例正常,人体处于动态平衡。
细菌耐药性的机制:(1) 灭活酶——主要为 β 内酰胺酶 (2 0 0多种) ,使抗生素失效。(2) 靶位改变——与抗生素结合靶位的改变 ,使抗生素作用下降。(3) 细菌膜通透性的改变——使抗生素不能或很少进入细菌体内到达作用靶位。细菌耐药性的发展从医院内菌株(如肠杆菌科、金黄色葡萄球菌)到医院外菌株(如肺炎链球菌、化脓性链球菌、淋球菌),其耐药性从对单种药物耐药发展至多重耐药,例如金黄色葡萄球菌对青霉素耐药;ESBL菌株对多种常用抗生素耐药。异常结果: 肠杆菌科、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、淋球菌等感染但是用抗生素无效或者效果不明显,细菌产生耐药性。需要检查的人群: 有上述情况的患者
不合宜人群: 没有检查前禁忌:注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。检查时要求:积极配合医生
β-内酰胺酶的检测临床标本中分离金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌以及最近发现的肠球菌属少数菌株对青霉素、氨苄青霉素出现耐药。由于上述菌株产生 β-内酰胺酶水解前述抗生素。检测该酶有下列方法:(1) 微生物活性消失法此法是以一株对青霉素高度敏感的枯草芽胞杆菌的指示菌,如待检菌株产生β内酰胺酶,破坏了青霉素,则在划线两边有枯草芽胞菌生长,否则指示菌仍呈很大抑菌环。(2) 淀粉-碘测定法β内酰胺酶破坏β内酰胺环,碘与被打开β内酰胺环结合,使蓝色的淀粉-碘复合物转变成无色。方法:用pH6.0磷酸缓冲液配制青霉素悬液 6000μg/ml,取该液0.1 ml置于微量稀释板凹孔中,挑选检测菌株数个菌落混悬于其中,摇动30min,静置室温中1h,加淀粉液2滴,再加碘液1滴,混合,立即观察颜色变化,阳性者当加入碘液后,首先立即出现蓝色、如在10min内消失蓝色,提示该菌产生β-内酰胺酶。(3) 酸测量法青霉素被β-内酶胺酶水解后成青霉素酸,pH值下降6.8以下,用酚红指示剂,由红(紫)色 (原液:枸橼酸缓冲液pH8.5) → 黄色(pH6.8以下)。(4) 头孢硝基噻吩显色反应头孢硝基噻吩(Nitrocefin)的β-内酰胺环被β-内酰胺酶打开,基质由黄色变成红色。液体方法:10mg头孢硝基噻吩溶解于lml的二甲基亚砜中,然后用0.1mol/L PBS(pH7.0)再稀释 1:20,最后浓度为500μg/m1,溶液呈黄或淡橙色,保存4-10℃,可用几个星期。取该溶液0.05ml置放于微量稀释板凹孔中或小试管中,挑取被试菌落,制成浓厚悬液,与凹孔中基质液混和,室温10- 30min,头孢硝基噻吩由黄变成红色为阳性,若显色不明显,观察可延长6h。有报道纸片法用于流感嗜血杆菌和淋病奈瑟菌检测β-内酰胺酶的结果是准确的,但对于某些菌株产生少量而与菌细胞紧密结合的β-内酰胺酶,如腐生葡萄球菌等,用液体法检测更好。上述任何一种检测方法都应用质量控制。
小儿细菌感染性口炎